Extracción “casera” de ADN
La presente práctica se puede realizar perfectamente en una cocina normal de una casa. Es más, en un laboratorio de un centro de enseñanza media es frecuente que no sedisponga de aparatos o reactivos necesarios para llevarla a cabo y que, por el contrario, siempre hay en una cocina (nevera con congelador, batidora, hielo, etc.)
MATERIAL Y REACTIVOS
• Muestravegetal
• Agua (destilada o mineral)
• Sal de mesa
• Bicarbonato sódico
• Detergente líquido o champú
• Alcohol isoamílico a 0ºC • Batidora
• Nevera
• Colador o centrífuga
• Vaso
• Tubode ensayo
• Varilla fina
FUNDAMENTO
La extracción de ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que los iones salinos son atraídos hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo sudisolución y posterior extracción de la célula. Se empieza por lisar (romper) las células mediante un detergente, vaciándose su contenido molecular en una disolución tampón en la que se disuelve elADN. En ese momento, el tampón contiene ADN y todo un surtido de restos moleculares: ARN, carbohidratos, proteínas y otras sustancias en menor proporción. Las proteínas asociadas al ADN, de granlongitud, se habrán fraccionado en cadenas más pequeñas y separado de él por acción del detergente. Sólo queda, por tanto, extraer el ADN de esa mezcla de tampón y detergente, para lo cual se utilizaalcohol isoamílico, probablemente el único reactivo de esta práctica que no suele haber en una cocina.
REALIZACIÓN
1. Preparar el tampón con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o enun baño de hielo triturado:
o 120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar agua del grifo.
o 1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura.
o 5 g de bicarbonato sódico.
o 5 mlde detergente líquido o champú.
2. Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales que pueda haber en la cocina (cebolla, ajo, tomates, etc.) y cortarla en cuadraditos.
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