1.11. ESTERILIZACIÓN DEL MEDIO DE CULTIVO
El medio nutritivo que se prepara inicialmente contiene una variedad de células vegetativas diferentes y de esporas, derivadas de los constituyentes del medio, del agua y del recipiente. Estos deben ser eliminados por un procedimiento adecuado antes de la inoculación. Existen un conjunto de procedimientos para la esterilización, pero en la prácticapara instalaciones a gran escala el calor es el principal mecanismo utilizado.
Esterilización por calor. Este el método más útil para la esterilización del medio nutritivo. Un conjunto de factores influyen en el éxito de la esterilización por calor: el número y el tipo de microorganismos presentes, la composición del medio de cultivo, el valor del pH y el tamaño de las partículas en suspensión.Las células vegetativas son eliminadas rápidamente a temperaturas relativamente bajas, como se muestra en la figura 5.31, pero para la destrucción de las esporas se necesitan temperaturas de 121ºC.
Las esporas de Bacillus stearothermophilus son las más resistentes al calor. Por consiguiente son utilizadas como organismos de ensayo para probar los distintos procedimientos utilizados paraesterilizar el equipo. La Tabla 5.19 proporciona daros sobre la relación entre temperatura, valor k y criterio de diseño para este organismo. En la Tabla 5.20 se da una lista de tiempos de esterilización y temperaturas para varios organismos.
a. Radiación (Rayos X, UV o rayos ?). Aunque ocasionalmente se utilizan en la industria de alimentos estos agentes no se utilizan en fermentación industrial.b. Métodos químicos. Aunque se conocen un conjunto de desinfectantes químicos no pueden ser utilizados para esterilizar medios nutritivos ya que existe el riesgo de inhibir el organismo de la fermentación debido a residuos del producto químico.
Tabla 5.19. Relación entre temperatura, valores K y el criterio de diseño en Bacillus stearothermophilus.
| || |
|TºC |K (min-1) |[pic] |
| | | |
|100 |0,019 |- |
|115 |0,666 |3,154 |
|118 |1,307 |6,341|
|121 |2,538 |12,549 |
|130 |17,524 |90,51 |
|140 |135,9 | |
|150 |956,1 | |
Tabla 5.20. Tiempo de esterilización y temperatura de esterilización de varios gruposde microorganismos.
| |Tiempo de |Temperatura de |
|Células |esterilización (min) |esterilización |
| | |ºC |
| | | |
|Célulasvegetativas |5-10 |60 |
|Esporas de | | |
|hongos/levaduras |15 |80 |
|Esporas de | | |
|Strepiomyces|5-10 |60-80 |
|Esporas bacterianas | | |
|en general |5 |121 |
|Esporas de | | |
|B. stearothermophilus |15 |121…
